一株酸性淀粉酶产生菌的筛选与发酵条件的优化(2)

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资料介绍

目录
摘要…………………………………………………………………………1
关键词………………………………………………………………………1
1 前言………………………………………………………………………1
1.1 酶的定义…………………………………………………………………… 1
1.2 淀粉酶的研究……………………………………………………………… 2
1.3 影响酶活力的因素……………………………………………………………4
1.3.1 pH对酶促反应速度的影响………………………………………………4
1.3.2 温度对酶促反应速度的影响…………………………………………… 4
1.3.3 酶浓度对酶促反应速度的影响………………………………………… 5
1.3.4 底物浓度对酶促反应速度的影响……………………………………… 5
1.3.5 激活剂对酶促反应速度的影响………………………………………… 5
1.3.6 抑制剂对酶促反应速度的影响………………………………………… 5
2 材料与方法………………………………………………………………………6
2.1 材料………………………………………………………………………… 6
2.1.1 菌种来源…………………………………………………………………6
2.1.2 实验仪器设备与药品……………………………………………………6
2.1.3 培养基……………………………………………………………………7
2.2 方法…………………………………………………………………………7
2.2.1 耐酸性淀粉酶产生菌的富集与筛选……………………………………7
2.2.2 耐酸性淀粉酶产生菌的复筛……………………………………………7
(1) 三角瓶液态发酵………………………………………………………… 7
(2) 麦芽糖标准曲线的制作………………………………………………… 7
(3) DNS法测酸性淀粉酶活性…………………………………………………7
2.2.3 耐酸性淀粉酶耐酸性检测………………………………………………8
2.2.4 菌株革兰氏染色和芽孢染色…………………………………8
（1）革兰氏染色……………………………………………………………8
（2）芽孢染色…………………………………………………………………8
2.2.5 发酵条件优化……………………………………………………………8
2.2.6 耐酸性淀粉酶聚丙烯酰胺活性凝胶电泳………………………………9
3 结果与分析…………………………………………………………………… 10
3.1 菌种筛选…………………………………………………………………… 10
3.1.1 初筛时能产酸性淀粉酶菌培养皿中颜色………………………………10
3.1.2 DNS法检测酸性淀粉酶活性……………………………………………12
3.2 菌种OYC07形态学分析……………………………………………………13
3.3 耐酸性淀粉酶发酵条件的优化…………………………………………… 13
3.3.1 发酵时间与酶活力关系…………………………………………………13
3.3.2 麸皮浓度酶活力关系……………………………………………………14
3.3.3 发酵温度酶活力关系……………………………………………………15
3.3.4 发酵转速与酶活力关系…………………………………………………15
3.3.5 发酵液pH与酶活力关系……………………………………………16
3.3.6 正交试验…………………………………………………………………17
3.4 耐酸性淀粉酶聚丙烯酰胺活性凝胶电泳…………………………………18
4结论………………………………………………………………………… 18
参考文献…………………………………………………………………………19