拟南芥中几个热相关miRNAs的响应热处理的表达分析(2)

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资料介绍

摘要………………………………………………………………………1
关键词………………………………………………………………………1
1 前言…………………………………………………………………………1
2 材料和仪器…………………………………………………………………3
2.1 实验仪器………………………………………………………………3
2.2 实验试剂………………………………………………………………3
3 实验方法……………………………………………………………………3
3．1 拟南芥叶片中RNA的提取与纯化……………………………………3
    3．1．1 总RNA的提取……………………………………………………3
    3.1.2 RNA纯化……………………………………………………………4
    3.1.3 RNA质量检测与浓度测定………………………………………4
3.2内参基因的选择…………………………………………………………4
3.3 PCR循环数的确定………………………………………………………4
3.4 PCR体系的优化……………………………………………………5
    3.4.1 优化引物用量……………………………………………………5
    3.4.2 优化退火温度……………………………………………………5
    3.4.3 PCR 反应模板浓度的确定………………………………………5
3.5 RT-PCR 克隆miRNA……………………………………………………5
    3.5.1 逆转录……………………………………………………………5
    3.5.2 PCR反应……………………………………………………………6
4 结果与分析………………………………………………………………7
4.1 不同时间热胁迫下拟南芥中miRNA的差异表达………………………8
5结论………………………………………………………………………8
参考文献………………………………………………………………………9
致谢……………………………………………………………………………10