中性蛋白酶高产菌株的筛选及产酶条件研究(选题审批表,任务书,开题报告,毕业论文14000字)
摘 要:本文从土壤中筛选得到一株产中性蛋白酶的菌株，并对影响该菌株发酵产酶的碳源种类及浓度，氮源种类及浓度，初始pH值，种龄及接种量，发酵温度及时间进行了单因素试验，选择影响显著的种龄，接种量，发酵温度和时间进行四因素三水平的正交试验，实验结果表明中性蛋白酶的最适产生条件为：1.5%玉米粉为碳源、2.5%鱼粉为氮源，发酵初始pH 7.5，种龄为48 h，接种量为5%，培养温度为30 ℃ ，培养时间为72 h，中性蛋白酶活达到16.62 IU/mL.
关键词：中性蛋白酶，菌株，正交试验
Studies on The Screening of The Neutral Protease Overproducting Strain and The Conditions of The Enzyme Production
Abstract: The strain producing neutral protease was screened from the soil in the paper. The single factor test was studied on the effect of the neutral protease production of the type and concentration of carbon and nitrogen source, initial pH, seed age, inoculum size, fermentation temperature and time. Four significant factors including seed age, inoculum size, fermentation temperature and time were designed in three levels for the orthogonal test. The results showed that the optimized conditions for neutral protease production were 1.5% of corn flour, 2.5% of fish meal, initial pH 7.5, 48 h of seed age, 5% of inoculum size, 30 ℃ of temperature, 72 h of time, the neutral protease activity could reach 16.62 IU/mL .
Key words: neutral protease，strain，orthogonal test
目 录
摘 要 1
关键词 1
1 前言 2
1.1 蛋白酶的分类 2
1.2 蛋白酶的生物调控作用 2
1.3.1 细菌来源的中性蛋白酶 3
1.3.2 真菌来源的中性蛋白酶 3
1.3.3 病毒来源的中性蛋白酶 4
1.4 中性蛋白酶的应用 4
1.4.1 食品工业中的应用 4
1.4.2 制革工业中的应用 5
1.4.3 化妆品中的应用 6
1.4.4 医药工业中的应用 6
1．5 中性蛋白酶的国内外研究现状 6
2 材料与方法 8
2.1 实验材料 8
2.1.1 菌种 8
2.1.2 培养基 8
2.1.3 主要仪器与设备 8
2.2 实验方法 8
2.2.1 菌种的分离纯化与筛选 8
2.2.2 培养条件 9
2.2.3 酪氨酸标准曲线的绘制 9
2.2.4 中性蛋白酶酶活力测定 9
2.2.5 菌种鉴定 10
2.2.6 最佳C源确定 10
2.2.7 最佳C源浓度确定 10
2.2.8 最佳N源确定 10
2.2.9 最佳N源浓度确定 10
2.2.10 初始pH对产酶的影响 10
2.2.11 种子液菌龄对产酶的影响 10
2.2.12 接种量对产酶的影响 10
2.2.13 温度对产酶的影响 10
2.2.14 发酵时间对产酶的影响 11
2.2.15 发酵条件的正交优化试验设计 11
3 结果与分析 11
3.1 酪氨酸标准曲线结果 11
3.2 茵种分离纯化和筛选 12
3．3 菌种鉴定 12
3．4 最佳C源确定 12
3．5 最佳C源浓度确定 13
3．6最佳N源确定 13
3．7最佳N源浓度确定 14
3．8 初始pH对产酶的影响 14
3．9 种子液菌龄对产酶的影响 15
3．10接种量对产酶的影响 15
3．11温度对产酶的影响 15
3．12 发酵时间对产酶的影响 16
3.13 发酵条件正交试验结果 16
4 讨论 17
5 结论 17
主要参考文献： 17
致 谢 21
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